RESUMO
La mayoría de las enfermedades de la pulpa dental y de los tejidos perirradiculares guardan relación con microorganismos. Los peptidoglucanos y el ácido lipoteicoico son dos de los principales componentes de las bacterias Gram positivas que tienen actividades relacionadas con el desarrollo de sepsis. Tras la invasión microbiana de estos tejidos, el huésped responde con defensas tanto inflamatorias inespecíficas como inmunológicas específicas. El tratamiento endodóncico quirúrgico y no quirúrgico son en esencia, procedimientos de desbridamiento destinados a destruir y eliminar el ecosistema microbiano, asociado con el proceso patológico. Es importante que los clínicos comprendan la íntima relación entre presencia de microorganismos y enfermedad endodóncica, con el fin de diseñar un tratamiento racional y efectivo; sobre todo en aquellos individuos susceptibles a Endocarditis Infecciosa. En el presente estudio se investigó la expresión de TNFα, IL-1 y COX-2 por efecto del ácido lipoteicoico (ALT) de Streptococcus sanguinis caracterizando las señales intracelulares involucradas en cardiomiocitos H9c2. La línea celular fue tratada con ALT a diferentes concentraciones durante 30 minutos. Comparadas con los controles, las respuestas al tratamiento con ALT fueron dependientes de la dosis y mediante un análisis de One Step RT-PCR (Invitrogen) se evaluó dicha expresión; la cual se asemeja a la respuesta fisiológica del organismo durante un episodio de Endocarditis infecciosa y a la agudización durante un procedimiento endodóncico.
Most dental pulp diseases and diseases of tissues surrounding the root are somehow related to micro-organisms. Peptidoglycans and lipoteichoic acid are two of the main Gram-positive bacteria components with activities related to sepsis development. When tissues sustain microbial invasion the host responds with both unspecific inflammatory defenses and specific immunological reactions. Surgical and non surgical endodontic treatments are essentially debridement procedures intended to destroy and eliminate the microbial eco-system associated to the pathological process. It is essential for clinicians to understand the intimate relationship existing between micro-organisms and endodontic disease, so as to be able to tailor a rational and effective treatment especially in subjects susceptible to infective endocarditis processes. In the present study research was conducted on TNFα, IL-1 COX-2 expression through the effect of lipoteichoic acid (LTA) of Streptococcus sanguinis by characterizing intra-cellular signals involved in H9c'' cardiomyocytes. The cell line was treated with LTA at different concentrations during 30 minutes. When compared to control group, responses to LTA treatment were dependent on dosage. That expression was assessed by means of a One Step RT-PCR (Invitrogen) analysis. It was noted that the aforementioned expression resembled the organisms's physiological response during an infective endocarditis episode and to exacerbation observed during an endodontic procedure.
RESUMO
Bactérias Gram-positivas presentes nas infecções dos canais radicularespossuem em sua parede celular ácido lipoteicóico (LTA), que apresentapotente ação citotóxica. O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade desubstâncias químicas auxiliares como hipoclorito de sódio 1%, clorexidina gel2%, extrato glicólico de própolis 12%, em neutralizar o ácido lipoteicóico deEnterococcus faecalis em canais radiculares, analisando os efeitos naprodução de citocinas (IL-1β, IL-6, TNF-α) por macrófagos (RAW 264.7).Solução salina fisiológica apirogênica 0,9% foi utilizada como controlepositivo. Foram utilizadas 40 raízes de dentes unirradiculares padronizadas,distribuídos em 4 grupos (n=10) em placas de poliestireno. Após esterilização, foram inoculados 10μL de uma solução de LTA de Enterococcus faecalis nos canais radiculares por 24h, processo repetido 3 vezes, e posteriormente, realizou-se a instrumentação dos canais radiculares. Foi realizada a coleta do conteúdo imediatamente após a instrumentação. Estas amostras foram utilizadas para verificar se as substâncias químicas apresentavam capacidade de neutralizar o LTA. Para tanto, macrófagos (RAW 264.7) foram ativados com as amostras coletadas dos canais radiculares e os sobrenadantes foram utilizados para verificar a produção de citocinas (IL-1β, IL-6, TNF-α) pelo teste imunoenzimático(ELISA). Os resultados foram analisados estatisticamente (Kruskal-Wallis, e teste de Dunn 5%). Em relação a produção de IL-1β e IL-6, os níveisencontrados nos grupos instrumentados com NaOCl e PRO foram inferioresaos grupos CLX e SS. Em TNF-α todos os grupos experimentais, NaOCl: 1496pg/mL, PRO: 1113pg/mL, CLX: 961pg/mL e SS: 1046pg/mL foramestatisticamente semelhantes entre si (p>0,05). Conclui-se que as substâncias químicas auxiliares testadas: NaOCl e PRO foram eficazes em neutralizar o ácido lipoteicóico (LTA) de E. faecalis em canais radiculares quando comparadas com o grupo SS (controle ...
The purpose of this study is to assess the ability of 1%sodiumhypochlorite, 2%chlorhexidine gel, 12 % glycolic extract of propolis and0,9%apyrogenic saline physiological solution in the neutralization of thelipoteichoic acid (LTA) derived from Enterococcus faecalis in root canalsby analyzing the production of IL-1β,IL-6,TNF-α by macrophages(RAW264.7). For this study, 40 single-rooted roots, standardized to 16mm,were used. The root canals were prepared using a 15K-file and thenprepared using rotatory system (BioRaCe) until the working length(15mm); the specimens were distributed in microplates with 10 specimens each. After sterilization, 10μL of E. faecalis LTA solution was used in the root canals, and subsequently was perfomed a root canal instrumentationwith rotatory system. The samples were then divided into 4 groups (n=10)on the basis of the irrigating agent used as follows: (a) NaOCl: 1%sodiumhypochlorite; (b) CLX: 2%chlorhexidine gel; (c) PRO: 12% glycolic extractof propolis; (d) group SS: 0,9%apyrogenic saline physiological solution.The root canal content was collected immediately after instrumentation toverify the production of IL-1β, IL-6, TNF-α, from the macrophages, testedby ELISA. Results were analyzed statistically by (Kruskal-Wallis test, pvalue = 0.0001 <0.05 and Dunn test 5%). Where it was found that in levelsfound in the groups instrumented with NaOCl and PRO were lower thanCLX and SS. TNF-α in all experimental groups, NaOCl: 1496pg/mL, PRO:1113pg/mL, CLX: 961pg/mL and SS: 1046pg/mL were statistically similar(p> 0.05). It is concluded that the auxiliary chemicals tested: NaOCl andPRO were effective in neutralizing the lipoteichoic acid (LTA) of E. faecalisin root canals compared with the SS group (positive control). For groupCLX cytokine production (IL-1β) and (IL-6) was higher than in the othergroups. proving to be less effective than other solutions. But all the substances ...
